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2024-3-14

一、精選內(nèi)毒素更低批次細胞對內(nèi)毒素非常敏感，過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)細胞釋放炎癥因子、引導(dǎo)細胞衰老或凋亡。不僅如此，胎牛血清會經(jīng)常或長時間作用于細胞，一旦內(nèi)毒素含量過高，細胞相當于長期在“有在毒培養(yǎng)基”中生長，被內(nèi)毒素影響，細胞將處于“亞健康狀態(tài)”，進而影響實驗結(jié)果的穩(wěn)定與準確性。因此，為保證細胞的健康，在培養(yǎng)細胞時，應(yīng)該選用內(nèi)毒素含量盡可能低的血清，以保障實驗的順利進行。Ausbian®進口特級胎牛血清，選擇內(nèi)毒素含量≤3EU/ml，澳洲進口血源，曾經(jīng)是細胞典藏等重大項目...

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如何應(yīng)對培養(yǎng)細胞的老化？細胞老化是有時能遇到的現(xiàn)象，尤其是干細胞。它有一些表現(xiàn)，如：細胞胞漿內(nèi)特別是在核區(qū)附近出現(xiàn)黑色顆粒細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡細胞立體感逐漸消失，部分細胞呈扁平狀細胞增殖速度下降細胞貼壁能力減弱等等細胞是否老化或衰老，還可以用細胞衰老檢測試劑盒來染色，該染色主要針對細胞的β半乳糖苷酶，這是一種特異性酶，如果染色陽性，表明細胞正處于老化過程。如果預(yù)防細胞老化？下面筆者提出幾條建議，供參考。1.不要等細胞長得太滿才傳代。細胞太密會導(dǎo)致細胞狀態(tài)下降，產(chǎn)生細胞接觸性抑制。2.細胞不要消化過度。... 查看詳情 2020-11-24
支原體污染給制藥業(yè)和科研帶來了哪些挑戰(zhàn)？支原體是真正的細菌，但它們沒有細胞壁，因此與“經(jīng)典”細菌相比，它們的多形性更高。由于支原體在細胞形態(tài)上具有可塑性，并且細胞尺寸較小，因此甚至可通過0.1μm的濾器。這也是為什么它們作為細胞培養(yǎng)衍生的生物制劑的潛在污染物而受到關(guān)注的原因之一，尤其是當生物反應(yīng)器為支原體生長提供有利條件時。支原體在人、動物、植物和昆蟲中普遍存在，因此，在生物制藥過程中使用的任何動植物來源原料都可能含有支原體。另一方面，某些支原體通過生物膜可以在環(huán)境中長期生存。支原體檢查是生物制藥生產(chǎn)過程中質(zhì)量控制... 查看詳情 2020-11-23
人骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng) 人軟骨損傷后，可用軟骨組織工程進行軟骨缺損修復(fù)。軟骨可由間充質(zhì)干細胞分化而來。因而，間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)和分化具有重要作用。間充質(zhì)干細胞（MSC）可以2×10的5次方／cm2的密度接種于特定的培養(yǎng)液(低糖DMEM，含15％FBS，100u/L氨卡青霉素，100mg／L鏈霉素，250mg／L兩性霉素)中，置于37℃、5％CO2和飽和濕度的孵箱內(nèi)培養(yǎng)。3天后更換培養(yǎng)液，小心棄去未貼壁細胞。以后每3天換液一次。MSC體外擴增時，是待細胞長至鋪滿瓶底80％時，用0.1％胰蛋白酶和0.0... 查看詳情 2020-11-20
論動物細胞的灌注培養(yǎng) 動物細胞的培養(yǎng)技術(shù)自上世紀初出現(xiàn)以來，經(jīng)歷了一個多世紀的發(fā)展，獲得了很大的進步。不僅建立了許多細胞系和培養(yǎng)了許多類型的原代細胞，而且開發(fā)了人工合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基，并且出現(xiàn)了細胞工程，哺乳動物細胞的大規(guī)模培養(yǎng)獲得了工業(yè)化的應(yīng)用，用于生產(chǎn)重組蛋白、單克隆抗體等生物藥、載體病毒、病毒性疫苗等。開發(fā)了微載體、中空纖維管和生物反應(yīng)器等，并且實現(xiàn)了一種不同以往的培養(yǎng)方式——灌注培養(yǎng)。目前，灌注培養(yǎng)已成為高產(chǎn)率培養(yǎng)細胞的主要方法。灌注培養(yǎng)有四個特點：一是能及時地補充營養(yǎng)物質(zhì)和排出代謝... 查看詳情 2020-11-20
支原體對細胞的不良影響，你應(yīng)該早知道近日《動物醫(yī)學進展》上有一篇文章《支原體對細胞培養(yǎng)污染的研究概況》（動物醫(yī)學進展，2013,34：112-117）談到“支原體污染細胞的嚴重性”，里面提到：支原體早發(fā)現(xiàn)于1898年，1956年Robinson等*從細胞培養(yǎng)物中分離出支原體，之后國內(nèi)外關(guān)于支原體污染細胞的報道屢見不鮮。它廣泛存在于自然界中，有100余種，污染細胞chang見的支原體包括發(fā)酵支原體（M.fementans）、豬鼻支原體（M.hyorhinis）、口腔支原體（M.orale）、精氨酸支原體（M.ar... 查看詳情 2020-11-19
實驗室內(nèi)支原體污染的預(yù)防解決方案潔凈臺、細胞培養(yǎng)箱內(nèi)部、培養(yǎng)箱水槽、液氮罐，培養(yǎng)間內(nèi)部的水浴鍋等環(huán)境被支原體污染，可對工作區(qū)域進行消毒。有以下三種方法：A、甲醛高錳酸鉀熏蒸消毒40%甲醛溶液用量為10ml/m3，高錳酸鉀用量為5g/m3先將稱好的高錳酸鉀放到開放性容器內(nèi)，然后倒入甲醛溶液人員迅速撤離，密閉消毒空間熏蒸消毒要求密閉消毒24h以上缺點：甲醛有刺激氣味，細胞間1-2周無法使用。B、酒精擦拭用75%的酒精對超凈臺、培養(yǎng)箱、桌面等進行擦拭再通風10分鐘紫外照射30分鐘缺點：操作較為繁瑣，酒精容易揮發(fā)，... 查看詳情 2020-11-19

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