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2024-3-14

一、精選內(nèi)毒素更低批次細胞對內(nèi)毒素非常敏感，過高的內(nèi)毒素可誘導細胞釋放炎癥因子、引導細胞衰老或凋亡。不僅如此，胎牛血清會經(jīng)常或長時間作用于細胞，一旦內(nèi)毒素含量過高，細胞相當于長期在“有在毒培養(yǎng)基”中生長，被內(nèi)毒素影響，細胞將處于“亞健康狀態(tài)”，進而影響實驗結果的穩(wěn)定與準確性。因此，為保證細胞的健康，在培養(yǎng)細胞時，應該選用內(nèi)毒素含量盡可能低的血清，以保障實驗的順利進行。Ausbian®進口特級胎牛血清，選擇內(nèi)毒素含量≤3EU/ml，澳洲進口血源，曾經(jīng)是細胞典藏等重大項目...

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細胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——真菌上一篇文章中，我們說到如果在養(yǎng)細胞的過程中，如何判斷細胞是否被細菌感染以及如何祛除細菌污染。還沒看的戳戳下面的鏈接直達細胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——細菌今天我們來討論一下，細胞培養(yǎng)過程中的真菌感染。二、真菌污染真菌概述真菌是一類具真核和細胞壁的異養(yǎng)生物。真菌可以通過孢子延續(xù)種群，典型的營養(yǎng)體為絲狀分支結構。可污染細胞培養(yǎng)基的真菌種類繁多，最常見的有曲霉菌，白色念珠菌，酵母菌，黑霉菌，孢子菌等。真菌污染癥狀與其他污染相比，真菌污染更容易被觀察到。具體表現(xiàn)為：在培養(yǎng)基中會形成淡黃... 查看詳情 2022-03-04
細胞培養(yǎng)注意事項~血清血清1、血清分為：a)新生牛血清（新生的小牛5天內(nèi)取血）；b)小牛血清（16周內(nèi)的小牛取血）；c)胎牛血清（剖腹取出胎兒制成的）。2、我們買來的血清多處于冰凍狀態(tài)，滅活前放到4度冰箱，使其緩慢溶化。56度水浴45分鐘滅活，滅活后冷卻至室溫再放回冰箱冷凍層中。滅活是滅活補體系統(tǒng)中具有蛋白酶活性的成分，對于一些難養(yǎng)的細胞，滅活補體是很重要的。但是滅活的溫度也可能會破壞血清中的生長因子，所以到底該不該滅活血清，還沒有一個很明確的標準，可能還是要視情況而定吧。3、血清在溶化過程中，纖... 查看詳情 2022-03-04
細胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——細菌細胞培養(yǎng)是生物醫(yī)學研究的常見操作，其中避免細菌污染是重要一環(huán)。細胞是否干凈，直接關系到實驗結果穩(wěn)定性的好壞。一般情況下細胞實驗過程中出現(xiàn)的常見污染主要有：細菌污染、真菌污染和支原體污染。每種情況又分別有不同的癥狀和解決方法。我們將分三篇文章，簡要概述三種不同污染的癥狀及處理方法。一、細菌污染細菌概述細菌是一種原核細胞微生物，一般為微米級別。細胞培養(yǎng)過程中常見的污染菌為大腸桿菌、葡萄球菌、假單胞菌等。細菌污染癥狀與其他污染相比，細菌污染在細胞培養(yǎng)過程中“發(fā)病”更為迅速，較容易被... 查看詳情 2022-03-03
支原體污染的細胞都會出現(xiàn)哪些表現(xiàn)？細胞培養(yǎng)被支原體污染是個世界性問題，在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%。支原體是一類無細胞壁，形態(tài)呈高度多形性，為圓形、絲狀或梨形，其直徑僅有0.13～0.18μm，變形能力大，故能通過濾菌器，突出的結構特征是沒有細胞壁，對作用于細胞壁生物合成的抗生素不敏感。研究表明，支原體能耗盡營養(yǎng)物，促進代謝積累，導致pH改變，對細胞造成多種影響，包括生長狀況、生化特性、代謝、免疫、以及細胞存活等多方面的改變，繼而干擾實驗結果，或造成無法解釋的差異。更加不幸的是拯救被感染的細胞幾乎是... 查看詳情 2022-03-03
細胞培養(yǎng)注意事項~培養(yǎng)基培養(yǎng)基1、培養(yǎng)基的選擇依細胞種類而定。如果是從別的實驗室借來的細胞，最初階段一定要保持細胞原有的培養(yǎng)條件；特殊種類的細胞，比如內(nèi)皮細胞，可以借鑒網(wǎng)上培養(yǎng)成功的條件，添加一些特定成分。2、液體培養(yǎng)基的保存條件應是冰箱4度冷藏。小六兒見過有的大實驗室細胞量多，一次性購買的培養(yǎng)基瓶數(shù)也多，有些人可能覺得-20冰箱保存時間會更久一些。但是經(jīng)過冷凍后的培養(yǎng)基再溶化時，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基的顏色發(fā)生變化，顏色變深，這就是培養(yǎng)基的PH值升高了。3、培養(yǎng)基中都含有大量的谷氨酰胺，用來合成細胞生長所... 查看詳情 2022-03-01
細胞培養(yǎng)注意事項~無菌操作無菌操作細胞培養(yǎng)最看重的就是無菌操作，無菌操作是細胞培養(yǎng)是否成功的關鍵點。1、使用前用75%的乙醇擦拭細胞間的桌面、超凈臺、孵箱和離心機等；紫外照射細胞間和超凈臺30分鐘以上才可以進入使用。2、進入細胞間必須穿上隔離服或者細胞間專用的白大衣，戴上手套和口罩，換上拖鞋，嚴格意義上來說，帽子也是要帶的。除了隔離服，其他穿著物品最好一次性使用。3、凡是放入超凈臺中的不是一次性使用的物品事先都需要經(jīng)過高壓滅菌；不能進行高壓處理的物品也需要經(jīng)過75%的乙醇消毒。包括酒精燈、吸管、移液器... 查看詳情 2022-03-01

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