在生物藥和細(xì)胞治療領(lǐng)域，支原體檢測(cè)*，它是避免外源因子污染，保證產(chǎn)品質(zhì)量的重要質(zhì)控手段。

我國(guó)藥典規(guī)定，有一些領(lǐng)域需要進(jìn)行支原體檢測(cè)。包括主細(xì)胞庫、工作細(xì)胞庫、生產(chǎn)終末細(xì)胞、檢定細(xì)胞、病毒種子批和病毒收獲液、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)材料如培養(yǎng)基、胰酶、臨床治療用干細(xì)胞和免疫細(xì)胞、新生牛血清以及雜交瘤細(xì)胞等。

上藥典規(guī)定的傳統(tǒng)支原體檢查方法為培養(yǎng)法和指示細(xì)胞染色法。該方法也為我國(guó)藥典所采用。但這些方法也存在一些不盡人意之處，如所需時(shí)間較長(zhǎng)，有的操作復(fù)雜等。有些支原體不容易培養(yǎng)，因而也存在漏檢的情況。指示細(xì)胞染色法存在假陽性情況。

從2007年開始，歐洲藥典、日本藥典和美國(guó)藥典，先后開始尋求支原體檢查的其他方法，主要的就是核酸擴(kuò)增技術(shù)，以PCR和qPCR方法為代表。國(guó)外也開發(fā)了符合歐洲藥典、日本藥典等藥典規(guī)定的支原體PCR試劑盒和支原體檢測(cè) qPCR試劑盒，以及支原體DNA提取試劑盒，其檢測(cè)限、特異性和耐用性均達(dá)到了這些藥典的規(guī)定，因而能替代培養(yǎng)法和指示細(xì)胞培養(yǎng)法（DNA染色法）

由于支原體污染容易發(fā)生，且肉眼不易識(shí)別，因此常規(guī)監(jiān)測(cè)和放行檢測(cè)均是需要的。支原體檢測(cè)產(chǎn)品生產(chǎn)商德國(guó)Minerva Biolabs公司(簡(jiǎn)稱MB公司)提供有放行檢測(cè)用支原體PCR試劑盒，qPCR試劑盒，支原體DNA提取試劑盒、支原體標(biāo)準(zhǔn)品（包括靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品、特異性驗(yàn)證用標(biāo)準(zhǔn)品以及qPCR定量標(biāo)準(zhǔn)品）。支原體PCR試劑盒和qPCR試劑盒均經(jīng)廠家全面驗(yàn)證（包括靈敏度、特異性和耐用性），達(dá)到歐洲藥典（EP 2.6.7）和日本藥典（JP G3）要求。每個(gè)批次產(chǎn)品均有廠家的質(zhì)檢報(bào)告（COA）。

我國(guó)藥典2020版在《通則3301 支原體檢查法》中也指出，除了培養(yǎng)法和指示細(xì)胞培養(yǎng)法（DNA染色法），“也可采用經(jīng)國(guó)家藥品檢定機(jī)枸認(rèn)可的其他方法。”

PCR方法操作簡(jiǎn)單，尤其是節(jié)省時(shí)間，以往十幾天才能出結(jié)果，現(xiàn)在2-3小時(shí)即可得出，大大提高了效率，節(jié)省了等待的時(shí)間，而結(jié)果又十分可靠。

但該方法在使用時(shí)，除了需要試劑盒被生產(chǎn)廠家提前驗(yàn)證外，還需要使用者對(duì)試劑盒進(jìn)行樣本基質(zhì)的適用性驗(yàn)證和操作驗(yàn)證。一旦過關(guān)后，就可以長(zhǎng)期使用了。

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